專利名稱：Gsk3抑制劑在制備治療高雄激素血癥藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及GSK3抑制劑在制備治療性藥物中的應(yīng)用，特別涉及其在制備治療高雄激素血癥中的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
雄激素是女性生殖生理過程中一種非常重要的激素，為卵巢尤其是卵泡合成雌激素的前體。正常月經(jīng)周期的卵泡期，血清睪酮濃度平均為0. 43ng/ml，高限為0. 68ng/ml，如超過0. 7ng/ml (等于2. 44nmol/L)，即稱為高睪酮血癥，或高雄激素血癥。女性血中雄激素水平過高，活性增強，是常見的婦科內(nèi)分泌紊亂疾病。臨床上用于治療高雄激素血癥的藥物主要有口服避孕藥、孕激素類、促性腺激素釋放激素、糖皮質(zhì)激素、安體舒通及胰島素增敏劑幾大種類，但其副作用均較大，不利于長期服用。糖原合成酶激酶3 (GSK3)是一種在真核生物中普遍存在的多功能酶，與糖代謝密切相關(guān)。GSK-3可以抑制糖原合成及葡萄糖轉(zhuǎn)運，促進(jìn)糖異生并阻礙胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，抑制胰島素分泌，從而發(fā)揮升高血糖的作用。GSK3在胰島素信號以及葡萄糖內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面起重要的調(diào)節(jié)作用。GSK3的特異性抑制劑SB415286能與ATP競爭抑制GSK-3 β，降低GSK-3 β 的磷酸化水平，進(jìn)而降低GSK-3 β的活性水平。本發(fā)明在進(jìn)行了大量的臨床試驗的基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)GSK3抑制劑可降低患者的雄激素水平，目前尚未有關(guān)于GSK3的抑制劑降低雄激素的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的第一個技術(shù)問題是提供GSK3抑制劑在制備治療高雄激素血癥藥物中的新用途。優(yōu)選的，所述的GSK3抑制劑為GSK3 β的特異性抑制劑SB415286。所述的GSK3 β抑制劑SB415286購自美國Santa公司。本發(fā)明所要解決的第二個技術(shù)問題是提供一種含有GSK3抑制劑的藥物組合物， 所述的藥物組合物包括治療上有效劑量的GSK3抑制劑及藥學(xué)上接受的載體組成。優(yōu)選的，所述的GSK3抑制劑的有效劑量為5 μ mol。更優(yōu)選的，所述的有效劑量的GSK3抑制劑為5 μ mol的GSK3 β的特異性抑制劑 SB4152860本發(fā)明的藥物組合物可僅含有本發(fā)明所述的GSK3抑制劑，也可含有其他藥學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明通過對7例患有高雄激素血癥的患者和10例正常對照組研究發(fā)現(xiàn)，GSK3抑制劑(GSK3i3的特異性抑制劑SB415286)可降低卵巢顆粒細(xì)胞分泌雄激素的的水平，并且在濃度為5μπι01時，效果最明顯。本發(fā)明的研究結(jié)果說明了 GSK3抑制劑可用于治療高雄激素血癥的藥物制備中。
具體實施例方式下面通過藥理性及臨床觀察實驗并結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明，應(yīng)該理解的是，這些實施例僅用于例證的目的，決不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。實施例1資料與方法1.研究對象選取2009年11月一 2010年4月在哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院生殖中心接受體外受精/單精子胞漿內(nèi)注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治療的17位不孕婦女，將其分為兩組。1. 1高雄激素血癥組(實驗組)選取2009年11月一 2010年3月在哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院生殖中心接受IVF/ICSI-ET治療的高雄激素血癥患者共7例，患者平均年齡 29. 29 土 1. 9 歲。1. 2對照組隨機選擇同期在該生殖中心接受IVF/ICSI-ET治療的不孕患者10 例，月經(jīng)規(guī)律，不孕原因為輸卵管因素，且基礎(chǔ)血(月經(jīng)第三天)FSH、LH、E2、T、催乳素(PRL) 在正常范圍內(nèi)，平均年齡在30. 17士3. 21歲。所有患者均為初次進(jìn)入周期，空腹血糖均正常，無全身性及其他內(nèi)分泌性疾病及婦科疾??；所有患者簽署知情同意書。2.研究方法和測定內(nèi)容2. 1標(biāo)本采集高雄激素血癥組和對照組均采用口服避孕藥(達(dá)英-3控制性超促排卵長方案治療，根據(jù)陰道B超和血清中LH、水平檢測卵泡發(fā)育。當(dāng)B超顯示下有一個卵泡平均直徑> 18mm，兩個卵泡平均直徑> 17mm，或者三個卵泡平均直徑> 16mm時，于當(dāng)日 21:30給予肌肉注射絨促性素(HCG)5000或10000iu，36小時后在陰道超聲引導(dǎo)下行采卵術(shù)，平均取卵數(shù)16個。取卵后留取卵泡液。2. 2人顆粒細(xì)胞分離與培養(yǎng)收集的卵泡液置于離心管中，室溫下1500r/min離心處理lOmin，棄上清，用磷酸鹽緩沖液(PBQ懸浮細(xì)胞后，以1 1的比例將細(xì)胞懸液緩慢加入到人淋巴細(xì)胞分離液上。再以2000/min度處理15min后，小心吸取中間層，并加入PBS 洗滌2次后，用巴斯德吸管反復(fù)吹打，將細(xì)胞吹打至單個細(xì)胞。用0. 4%臺盼藍(lán)測定細(xì)胞活性，細(xì)胞活性大于80%。加入含有5%胎牛血清，100IU/ml青霉素，0. lmg/ml鏈霉素的DMEM 培養(yǎng)液，使細(xì)胞密度為1. 5xl05/ml，均勻的接種于M孔板上，共計4個重復(fù)，共接種3塊板， 在37、C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，顯微鏡下觀察細(xì)胞貼壁伸展后，繼續(xù)培養(yǎng)48h，顯微鏡下觀察細(xì)胞貼壁率達(dá)到80%以上，收集培養(yǎng)液上清備用。2. 3 GSK3抑制劑對顆粒細(xì)胞分泌功能的影響將濃度為 100μπιο1、50μπιο1、25μπιο1、10μπιο1、5μπιο1、0μπιο1 的 GSK3 β 的特異性抑制劑SB415286加入到培養(yǎng)4 后貼壁伸展的高雄激素血癥患者的顆粒細(xì)胞中，放于 37C°C,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育4 后，收集培養(yǎng)液上清用放射免疫法測定睪酮(T)。3.實驗器材及試劑GSK3抑制劑SB415286 (Santa,美國)DMEM(GIBC0，美國)，淋巴細(xì)胞分離液 (Percoll)購于 GE Healthcare Bio-science AB (瑞典)，F(xiàn)BS (GIBC0，美國)，青-鏈霉素 (GIBC0，美國)，PBS(GIBC0，美國) 孔培養(yǎng)板(Corning，德國)，T試劑盒(西門子，德國)；超凈工作臺(SW — Cl，中國江蘇)。4.統(tǒng)計學(xué)方法實驗數(shù)據(jù)用X ± S表示，應(yīng)用SPSS15. 0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行分析，計量資料均以X 士 S 表示，P < 0. 05為差異顯著，多樣本間采用單因素方差分析，兩樣本間方差齊采用t檢驗， 方差不齊，采用t'檢驗。結(jié)果如下表所示
權(quán)利要求
1.GSK3抑制劑在制備治療高雄激素血癥藥物中的用途。
2.如權(quán)利要求1所述的GSK3抑制劑在制備治療高雄激素血癥藥物中的用途，其特征在于所述的GSK3抑制劑為GSK3 β的特異性抑制劑SB415286。
3.一種用于治療高雄激素血癥的藥物組合物，包括治療上有效劑量的權(quán)利要求1或2 所述的GSK3抑制劑及藥學(xué)上接受的載體。
4.如權(quán)利要求3所述的一種藥物組合物，其特征在于，所述的有效劑量的GSK3抑制劑為5μπιο1的GSK3抑制劑。
5.如權(quán)利要求4所述的一種藥物組合物，其特征在于，所述的有效劑量的GSK3抑制劑為5 μ mo 1的GSK3 β的特異性抑制劑SB415286。
全文摘要
本發(fā)明公開了GSK3抑制劑在制備治療高雄激素血癥藥物中的用途，特別是GSK3β的特異性抑制劑SB415286在制備治療高雄激素血癥藥物中的用途，本發(fā)明還提供了一種用于治療高雄激素血癥的藥物組合物，包括治療上有效劑量的權(quán)利要求1或2所述的GSK3抑制劑及藥學(xué)上接受的載體。本發(fā)明公開的GSK3抑制劑在制備治療高雄激素血癥藥物中的用途，其特征在于當(dāng)GSK3抑制劑的劑量為5μmol時，可達(dá)到最佳治療效果。
文檔編號A61K31/4015GK102258783SQ20111019746
公開日2011年11月30日 申請日期2011年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月14日
發(fā)明者吳效科, 桑敏, 馬紅麗 申請人:吳效科