專利名稱：：抗糖皮質激素藥物的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及藥物，特別是非甾族化合物的天然物的抗糖皮質激素制劑，即，該制劑的化學結構中不含甾核(sterannucleus)。本發(fā)明的目的是防御哺乳動物的身體細胞受到糖皮質激素的作用。
背景技術：
：已知下列抑制糖皮質激素物質可用于藥物1．在不同階段抑制甾族激素合成的物質(在合成甾族激素的各個段進行催化的酶的抑制劑[I])a)二苯基甲烷衍生物，如氨苯丁酮B(它在羥化酶的11-β-、17-和21-段抑制了甾族激素的合成)b)吡啶衍生物(SU-c系列)，如metirapon(它在羥化酶的11-β-段抑制了甾族激素的合成)；c)取代的α,α-谷氨酰胺，如氨魯米特(aminoglutetimide)(它通過抑制20-α-羥化酶和C20、C-22-釋放酶(liase)來阻礙從膽固醇合成17-乙炔睪甾酮)；d)甾族物質，如腈環(huán)氧雄烷(3β-取代的甾族-3β-羥基-5-雄甾烷-17-酮)，它抑制了3β-脫氧甾族羥化酶-5,4-異構酶[4]。2．抑制糖皮質激素與激素受體相互作用的物質a)甾族物質，如米非司酮(11β-取代的甾族衍生物-11β-(4-二甲基-氨基苯基)-17β-羥基-17α-(丙-1-炔基)-雌-4,9-二醇-3-酮)，它在糖皮質激素受體上作用以形成不能引發(fā)糖皮質激素作用機制的配合物[3]；b)非甾族物質[2]，如鹽酸屈他維林(一種異喹啉的衍生物-1-(3,4-二乙氧基苯基亞甲基)-6,7-二乙氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉)或乙酰水楊酸[5]。上述制劑作為組份摻入各種藥物中具有決定性的抗糖皮質激素作用。也已知上述制劑有許多明顯的缺陷1．依賴靶向酶，抑制糖皮質激素合成的制劑也抑制其它甾族激素(如性甾族化合物和/或礦物類皮質激素的合成)，并引起被抑制的酶的以前所作用的物質的積累，該物質也顯示出激素活性。2．第二組制劑的特異性作用水平很低，即，除了抗糖皮質激素作用外，它們也有其它的甾族類抗激素作用。3．所有的甾族物質以一種方式或其它方式在人體器官中干擾甾族化合物的平衡。這類物質可形成具有不同于最初給予病人的物質活性的代謝物。在上述米非司酮制劑(RU486)制劑中，含甾核的藥物最沒有上述的缺陷，它在阻滯糖皮質激素受體中的特異性最強，其藥理作用最接近于本申請的藥物組。在如[3]和[6]中對米非司酮作了更為詳盡的闡述。在本申請中，米非司酮將與本申請的抗糖皮質激素藥物(下面稱為“提議藥物”)進行藥效對比。與它的優(yōu)點一起，米非司酮象其它類似物也有許多缺點-僅在高劑量下有效(400毫克/天)；-其結構含甾核；-它影響性甾族化合物、孕激素和礦物類皮質激素的受體。也已知昆蟲信息激素(pheromones)，即昆蟲產生和分泌入環(huán)境的物質，具有特定的氣味，它可對相同類型的昆蟲敏感膜中的特定(信息激素)受體產生作用，這使昆蟲產生典型的行為反應或程序，如吸引異性的昆蟲到達特定的相遇點，制備肥料等[8]。信息激素的一組特別包括，長鏈脂族不飽和醇、醚和乙酸酯，含有10-21個碳原子的直鏈烴鏈。該組的信息激素可用作家用和農用殺蟲劑[7,8]。上述信息激素和它們的合成類似物和衍生物的理化性質(特別是長鏈烴結構具有的顯著的疏水性質)很容易溶于脂肪，并能摻入生物膜中，改變這類膜的物理和機械性質(液化性、滲透能力)。后者的性質使所述的信息激素可用作制備增加膜透皮滲透能力的制劑中的一個組份[10]。給定的信息激素的疏水傾向解釋了它們在這類信息激素的生物性質在目前醫(yī)學和生物學中的應用。這類性質是1)麻醉性質，使這類信息激素用作麻醉劑[11]；2)抑制細菌[12]和病毒[13,14]的能力，使它們可用于醫(yī)學和生物學；3)誘發(fā)溶紅血球的能力[15]，使它們可用作溶紅血球的誘發(fā)劑[15]。很顯然，上述給定信息激素和它們的合成類似物和衍生物的公知性質及其這類信息激素、類似物和衍生物在化妝品、農業(yè)和生物學上的應用與抗糖皮質激素活性無關(其具體證據將在下面作闡述)；這解釋了為什么我們所知的專家們對上述物質在產生抗糖皮質激素作用方面應用沒有興趣。發(fā)明詳述本發(fā)明的目的是1)消除上述抗糖皮質激素類似物所具備的典型的缺陷；2)創(chuàng)制一類新藥，所述的新藥具有以下特征a)能有效抑制糖皮質激素作用；b)適合治療廣范圍的病原體疾?。籧)具有低毒性和高治療系數(shù)。上述目的可通過使用抗糖皮質激素藥物非甾族昆蟲信息激素(即信息激素的化學結構中不含甾核)或所述信息激素的合成類似物來達到，所述的合成類似物包括不飽和長鏈脂肪醇或醛或醚，所述的脂肪醇或醛或醚在直鏈烴鏈上含有10-21個碳原子。在本發(fā)明者進行研究的基礎上得到上述選擇，該研究發(fā)現(xiàn)了給定組合物具有的新的生物性質；這類性質能抑制哺乳動物腺體里的體細胞上的受體介導的糖皮質激素作用。正是給定組合物的性質-發(fā)明者尚不知它們的來源-讓本發(fā)明的目的得以實現(xiàn)。此外，為了增加療效，可使用多種信息激素和/或它們的合成類似物的混合物。在選擇組成混合物的物質時，應當是使組份的疏水傾向的差別很大(組份的疏水傾向與組份烴鏈的長度成比例)烴鏈間的長度差至少為5。除了上面所述的，應當說通過使用信息激素的衍生物和/或它們的合成類似物可簡便地產生特定的醫(yī)藥產品，它們的選擇應當遵從相同的原則。基于昆蟲信息激素的藥物含一種、兩種或多種藥物，它與無熱原的水，一種生理學上能配伍的緩沖液(或其它藥學上可接受的載體)混合，或封入微膠囊(如人工脂質結構(脂質體)或其它藥學上可接受的載體)。這類藥物以片劑、膠囊劑、指示溶液劑、軟膏劑等等。提出的藥物結構使它能產生對糖皮質激素受體的功能有特異性抑制作用的藥物，并適合于治療廣范圍的疾病。下列實施例顯示了生產本發(fā)明藥物的可行性。實施例1用1個信息激素或其合成類似物在22℃下將500毫克脂質體(摩爾比為10∶0.1的二棕櫚酰磷脂酰膽堿和磷脂酰絲氨酸)和100毫克Z-11-十四碳烯醇(tetradecinol)(烴鏈長度為14、在11位上有反式雙鍵的不飽和脂肪醇)溶于500毫升氯仿，并置于厚壁的圓底4升燒瓶中。將燒瓶放在旋轉蒸發(fā)器上，在65℃下除去溶劑。在燒瓶壁上形成薄的半透膜。將燒瓶放在裝有氮氣閥的干燥室內，進一步在真空下干燥1小時。向燒瓶中加入10毫升雙蒸的去離子水。燒瓶通入氦后，通過在65℃下激烈振搖1小時使膜脫水。結果得到綠色稠厚的凝膠。凝膠用90毫升磷酸鹽緩沖液稀釋(pH=7,4,22℃)并在22℃下振搖30分鐘。結果形成了100毫升懸浮液。該懸浮液在44kHz的超聲波下超聲30次，每次30秒，在振搖之間間隔1分鐘。所得的懸浮液在氮氣壓下經500納米和100納米孔徑的聚碳酸酯膜壓縮。形成了含有80-130納米大小的單層脂質體水性懸浮液的乳白色懸浮液，其中脂質體含500毫克脂質和100毫克Z-11-十四碳烯醇。這樣得到的100毫升懸浮液分散在120毫升已經加熱到80℃的軟膏劑基質中，所述的基質包括凡士林、蠟和山梨醇三油酸酯(其比例為30∶2∶5)。這樣得到的霜劑包裝在2克管中，它含1毫克Z-11-十四碳烯醇和2克脂質體霜劑。實施例2用2個信息激素或它們的合成類似物將100毫克Z-(9)-十四碳烯醇(烴鏈長度為14的不飽和脂肪醚，在9-位有反式雙鍵)和30毫克Z-11-十七碳烯醇(烴鏈長度為19不飽和脂肪醇，在11-位有反式雙鍵)溶于500毫升滅菌的橄欖油中。所得的溶液倒入瓶中，然后滅菌并密封。這得到了適合于注射(皮下注射)用的藥物。實施例3用1個信息激素衍生物(脂族不飽和醇芐基醚(Z-(14)十七碳烯醇)在22℃下將500毫克脂質體(摩爾比為1∶0.01∶0.5的磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和膽甾醇)溶于400毫升乙醚。在60℃下將50毫升Z-(14)-十七碳烯苯甲酸酯溶于1毫升二甲亞砜，然后冷卻到22℃并滴加入400毫升乙醚脂質體溶液。混合所得的溶液。向溶液中加入100毫升雙蒸水。這樣得到的兩相系統(tǒng)用超聲波處理直至有邊界劃分的兩相消失并形成分散系統(tǒng)(乳液)。有機相在超過存在于混合物中的難熔的磷脂的相轉移溫度下(60℃)在旋轉蒸發(fā)器中消失；此時蒸發(fā)過程的真空逐漸增加到0.1托。得到100毫升稠厚的凝膠。在液氮中冷凍后，凝膠經凍干得到550毫克粉末。粉末被壓入片劑，每片含50毫克脂質體和5毫克Z-(14)-十七碳烯苯甲酸酯。另外，粉末也可包裝入瓶中，每個含50毫克脂質體和5毫克Z-(14)-十七碳烯苯甲酸酯。這得到了適合口服、非胃腸道給藥或鼻內給藥的藥物。發(fā)明者試驗了給定組中公知昆蟲的信息激素(或這類信息激素的合成類似物)，以測定它們對哺乳動物的乳腺體細胞有否抗糖皮質激素作用。發(fā)現(xiàn)所有這類信息激素具有一定程度的給定性質。在每個特定情況下選擇信息激素由以下因素而定，即信息激素的易得程度、它們與給定賦形劑的配伍能力、它們滲入生物結構的能力、信息激素制劑的安全儲存期、它們的毒性和對本發(fā)明的抗激素作用主題來說不是至關重要的其它因素。很顯然，可以使用各種組合的信息激素以治療特定類型的疾病。對信息激素或它們合成類似物組合的選擇取決于組份的疏水性，該因素對各種組織和器官的生可親性是關鍵的。例如，相對親水性的物質優(yōu)先滲透入腎臟，而相對疏水性的物質則更適合滲透到肝臟和大腦。實用性下表1、2、3和4顯示了提出的藥物與類似物和對照組比較的試驗結果。表1顯示用本發(fā)明藥物治療各種由糖皮質激素活性過量導致的典型疾病的作用。表2顯示用本發(fā)明對糖皮質激素誘導的皮膚萎縮的治療作用(即，抑制由β-mazone引起的皮膚變薄)。表3顯示了本發(fā)明藥物在治療典型的體力衰竭(在池中游泳)的抗糖皮質激素抗分解代謝(anticatabolic)作用。從下表1和2中可見，本發(fā)明的試驗化合物可廣泛地用來治療與糖皮質激素和細胞毒性因子作用相關的疾??；此外，其效力被認為高于一般使用的類似物或制劑。從表3可見，本發(fā)明藥物比其類似物在體力激烈運動階段，在器官中阻滯分解代謝的進展(糖皮質激素介導的)中更為有效。表1用本發(fā)明藥物對治療由糖皮質激素活性過度導致的各種典型的疾病的作用<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="702">疾病類型使用的藥物；給藥方式；劑量效果指數(shù)123涉及Zucker系大鼠糖皮質激素過多性肥胖20天后體重增加的減速(％)本發(fā)明藥物；10毫克/公斤劑量每天皮下注射一次88％米非司酮；10毫克/公斤劑量每天皮下注射一次(實施例1)53％對照0％給胃粘膜使用100％乙酸，接著每天給予2.5mg/kg氫化可的松導致的胃潰瘍；Wistar鼠長期使用氫化可的松(14天)導致的治愈減緩的逆轉；本發(fā)明藥物；5毫克/kg每天肌注3次達14天(實施例1)87米非司酮；肌注20毫克/kg劑量，每天3次，持續(xù)14天45西咪替丁1；肌注20毫克/kg劑量，每天3次，持續(xù)14天15對照0試驗性的心肌梗塞；非譜系大鼠壞疽范圍的減少(％)；1天后7天后對照00本發(fā)明藥物；單劑10毫克/kg肌注(實施例3)6889米非司酮(RU486)；單劑20毫克/kg肌注1728</table></tables><tablesid="table2"num="002"><tablewidth="694">硝酸甘油2；單次肌注3055由創(chuàng)傷導致的非譜系大鼠的胸腺退化退化的抑制STF3(質量％)對照(無傷的鼠)00本發(fā)明藥物；創(chuàng)傷后肌注5毫克/kg，每天3次，持續(xù)5天7057米非司酮；創(chuàng)傷后肌注20毫克/kg劑量，每天3次，持續(xù)5天2517左旋咪唑4；創(chuàng)傷后肌注20毫克/kg劑量，每天3次，持續(xù)5天520</table></tables>1西咪替丁在這里用作附加的比較制劑；它具有其它作用機制(即不涉及抗糖皮質激素作用)，但是它是目前最廣泛地用于治療給定疾病的藥物之一。2硝酸甘油在這里用作附加的比較制劑；它具有其它作用機制(即不涉及抗糖皮質激素作用)，但是它是目前最廣泛地用于治療給定疾病的藥物之一。3血清胸腺因子的濃度。4左旋咪唑在這里用作附加的比較制劑；它具有其它作用機制(即不涉及抗糖皮質激素作用)，但是它是目前最廣泛地用于治療給定疾病的藥物之一。表2用本發(fā)明的藥物治療糖皮質激素誘發(fā)的皮膚萎縮的作用(即，抑制由betamazone引起的皮膚變薄)<tablesid="table3"num="003"><tablewidth="694">使用的藥物；給藥方式；劑量5對由betamazone6導致的皮膚變薄(萎縮)的抑制(％)對照0米非司酮(RU486)；1.5納米/cm27本發(fā)明藥物；0.5納米/cm2(實施例2)871.25-二羥基維生素D37；1納米/cm265</table></tables>5每天給予該制劑，持續(xù)10天，與betamazone平行給藥。對于這些試驗使用C3H鼠(每組用8-10個鼠)。6betamazone每天給予2.5納米/cm2,持續(xù)10天。71.25-二羥基維生素D3在這里用作附加的比較制劑；它具有其它作用機制(即不涉及抗糖皮質激素作用)，但是它是目前最廣泛地用于治療給定疾病的藥物之一。表3本發(fā)明藥物在治療典型的體力衰竭(在池中游泳)中的抗糖皮質激素作用(抗代謝分解)<tablesid="table4"num="004"><tablewidth="694">使用的藥物；給藥方式8肌肉質量的改變(7天后，％)肌纖維蛋白酶的活性改變9(7天后，％)在白細胞中糖皮質激素受體活性的改變(7天后，％)無傷動物000對照-10+20+35本發(fā)明藥物；10毫克/kg,激烈活動后5分鐘口服+2000米非司酮(RU486)；激烈活動后5分鐘口服+5+7+20</table></tables>8在這些試驗中使用非譜素的大鼠(每組6-8個大鼠)。9這是糖皮質激素對心肌細胞代謝分解作用的最重要生化指標之一。10這表示激素受體相互作用的活性水平和激素對肌肉細胞的影響水平。除了上述實驗得到的特定結果外，堅持觀察副作用和毒性作用，如對皮膚和粘膜的刺激；心血管、消化和排泄系統(tǒng)的失衡；過敏反應等等。本發(fā)明藥物的治療指數(shù)是100-300，它明顯地比米非司酮(RU486)的治療指數(shù)范圍寬。使用本發(fā)明藥物時對用于試驗的動物血液中的性甾族化合物水平和礦物類皮質激素的監(jiān)測發(fā)現(xiàn)沒有任何改變。我們認為本發(fā)明藥物滿足專利所需的標準。它是a)新的(根據我們的了解，沒有使用昆蟲信息激素作為抗激素的藥物的情況)；b)它適合于工業(yè)生產(可從實施例和表中的結果顯示)；c)顯示了發(fā)明的程度(即，對專家來說非顯而易見)。后者的陳述可由下列論證來證實1)就發(fā)明者了解，沒有一種已知的非甾族糖皮質激素制劑可抑制細菌和病毒或誘發(fā)溶解紅細胞，從而得到其抗糖皮質激素作用，即目前尚未觀察到上述信息激素的生物性質(即“技術”部分述及的性質)和抗皮質激素作用之間的聯(lián)系。2)給定組的信息激素的生物性質(“技術”部分述及的性質，即抑制細菌和病毒，誘發(fā)溶解紅細胞)僅在濃度數(shù)十倍地高于有糖皮質激素作用的信息激素上觀察到(從表中的試驗結果可見)。從經典內分泌學角度來看，后者的事實表明了給定性質的非特異性(即，抑制、誘發(fā))。這是證明信息激素早期公知的性質與信息激素抗糖皮質激素無關聯(lián)的又一個證據。3)通常知道病毒或細菌都沒有對糖皮質激素或合成的糖皮質激素敏感的受體；因此病毒和細菌對糖皮質激素或對抗糖皮質激素都沒有作用點。4)人們公知紅細胞沒有核；因而它們對糖皮質激素沒有作用點，也不合成對糖皮質激素敏感的受體。這樣該強有力的性質(即溶膜)不是由抗皮質激素的作用導致的。對于出乎意料地使用信息激素作為抗糖皮質激素可以推導出其它強有力的證據，即，顯示本發(fā)明藥物滿足發(fā)明所需水平的證據。參考文獻1)“甾族激素代謝物的改性劑它們的化學、生物化學和臨床操作回顧”甾族生物化學雜志(J.SteroidBiochem)，第5卷，501頁，1974。2)W.L.Duax,J.F.Griffin,C.M.Weeks,Wawrzak“甾族拮抗劑作用機制晶體圖像研究的觀點”甾族生物化學雜志(J.SteroidBiochem),31卷，481-492頁，1988。3)C.M.Bamberger和G.P.Chrousos“糖皮質激素受體和RU4人”，甾族受體和抗激素(Steroidreceptorandantihormones)，紐約科學院年報，761卷，296-310頁，1995。4)G.O.Potts,J.E.Creange,H.R.Hording,H.P.Shahe“Trilostane,口服用的甾族生物合成活性抑制劑”甾族(Steroids),32卷，257頁。5)V.P.Golikov，“糖皮質激素作用的受體機制”MoskovskayaMeditsina,1990。6)H.J.Klosterterboer,G.H.Deckers,M.E.deGooer,RDijkema,E.O.M.Orlemans,W.G.E.J.Schoonen“新的選擇性抗孕激素(antiprogesten)的藥理性質Org33628”,“甾族受體和抗激素，紐約科學院年報”，761卷，192-201頁，1995。7)V.N.Burov,A.P.Sazon，在植物保護中的生物活性物質，莫斯科，1987,96-116。8)同上，79頁。9)昆蟲信息激素技術化學和應用。華盛頓，10)R.O.Potts,M.L.Francoer，含滲透增強劑的局部用藥，歐洲專利申請EP331382(Cl.A61K47/00/06,1989年9月)，美國專利161926,1988年2月29日。11)M.J.Pringle,K.B.Brown,K.Miller,“Canthelipidtheoriesofanestheasiaaccountforthecutoffinanestheticpotencyinhomologousseriesofalcohols”Mol.Pharmacol,1981,19卷，第1號，49-55頁。12)T.Nanba,Y.Hattori,Y.Tsuda,H.miyaji,“用于控制齲齒的含脂肪酸和不飽和醇的牙粉”Jpn.KokaiTokioKohoJP6388123[8888123](CIA61K31/20)1988年4月19日。13)J.Sands,D.Auperin,W.Snipes,“包封病毒，包括肝炎簡單體對長鏈不飽和單甘油酸酯和醇的極端敏感性”抗微生物劑化學治療劑(Antimicrob.AgentChemother)，15卷，第1號，67-73頁。14)J.Sands,P.Landin,D.Auperin,A.Rheinhardt.“包封病毒被脂肪酸衍生物的失活”?？刮⑸飫?，化學治療劑15卷第1號134-136頁。15)OsirioeCastro等，“由肽毒素、多元醇類的脂肪醇和亞芐基衍生物”，激發(fā)的紅血球溶血以及螢光偏振的改變Biochem.Biophys,Acta,1990,1029卷，第2號，252-258頁。權利要求1．一種非甾族的昆蟲信息激素(或這類信息激素衍生物或合成類似物，其中類似物包括不飽和脂肪醇、醛或醚，它們具有含10-21個碳原子的直鏈烴鏈)作為抗糖皮質激素藥物的用途2．一種根據權利要求1所述的藥物，其特征在于它含有兩個或多個昆蟲信息激素和/或信息激素衍生物和/或信息激素的合成類似物，而混合物中組份之間的直鏈脂肪鏈長度差至少為5個碳原子。全文摘要本發(fā)明涉及藥物和獸醫(yī)領域,特別涉及非甾族抗糖皮質激素。本發(fā)明的目的基于創(chuàng)制一類在調節(jié)哺乳動物細胞對糖皮質激素敏感性的低毒性和高活性的新藥。具有長鏈的脂族非甾族結構或其合成類似物或衍生物(不飽和脂肪醇、醛或酯)的昆蟲信息激素對于特異性地抑制糖皮質激素對哺乳動物細胞的影響有新的用途。這些信息激素的脂族碳鏈長度可為10—21碳原子。也可將兩種或多種信息激素和/或它們的合成類似物和衍生物組合使用以增加治療活性,在與脂族碳鏈長度成正比的不同的疏水性基礎上作為選擇。這些鏈的長度差不少于5個碳原子。本發(fā)明也揭示了藥物的制劑形式和比較其高活性實驗的結果。文檔編號A61K31/075GK1213964SQ96180161公開日1999年4月14日申請日期1996年2月1日優(yōu)先權日1996年1月31日發(fā)明者S·D·布爾拉科夫,D·D·亨肯,K·G·蘇爾科夫,V·V·泰茲申請人:S·D·布爾拉科夫,D·D·亨肯,K·G·蘇爾科夫,V·V·泰茲