專利名稱：一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途，特別是糜蛋白酶制劑在治療腫瘤中的用途。
背景技術(shù)：
關(guān)于蛋白水解酶應(yīng)用于治療腫瘤方面，于1902年就有人用胰汁酶液治療各種腫瘤取得了一定的效果，引起了很多學(xué)者與臨床醫(yī)生的興趣。從很多病例中觀察到，將胰蛋白酶引入腫瘤，很快使組織軟化。近幾年來，從國(guó)外一些國(guó)家得到有關(guān)酶療法治療腫瘤的資料中表明，蛋白水解酶對(duì)各種腫瘤都有很好的臨床效果。酶制劑局部注射，同時(shí)早期使用，采用足夠的劑量，甚至在體癥有明顯緩解之后再繼續(xù)使用，這樣酶療法就會(huì)有肯定的效果。近十年來，某醫(yī)院對(duì) 13000例腫瘤患者長(zhǎng)期使用蛋白酶，結(jié)果都取得了一定的療效。國(guó)內(nèi)，以蛋白水解酶治療腫瘤的工作還沒有系統(tǒng)開展。蛋白水解酶的制劑有糜蛋白酶、胰蛋白酶、糜胰蛋白酶、木瓜酶、菠蘿酶、無花果酶、脫氧核糖核酸酶以及各種菌類的蛋白酶等。糜蛋白酶系自?；蜇i胰中提取的一種蛋白水解酶，現(xiàn)臨床上用于促進(jìn)血凝塊、膿性分泌物和壞死組織等的消化清除，用于眼科手術(shù)以松弛睫狀肌韌帶，減輕創(chuàng)傷性虹膜睫狀體炎；也可用于創(chuàng)口或局部炎癥，以減少局部分泌和水腫。與其他蛋白水解酶相比，它具有酶活力高，作用范圍廣，抗原性小，使用安全等優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途，特別是糜蛋白酶制劑在治療腫瘤中的用途。利用糜蛋白酶制劑作為抗腫瘤藥物，治療腫瘤。所述糜蛋白酶制劑的主要成分為糜蛋白酶，系自牛或豬胰中提取的一種蛋白水解酶。主要輔料有右旋糖酐、甘露醇和注射用水。本發(fā)明開拓了蛋白水解酶制劑治療腫瘤的新用途,體外細(xì)胞研究和體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn)研究證明糜蛋白酶制劑對(duì)腫瘤細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤有顯著療效，可用于腫瘤治療，并且對(duì)正常組織毫無影響。酶療法與其他療法相比較，其優(yōu)點(diǎn)是(I)在放化療前后采用酶制劑不論主客觀癥狀(嘔吐、腹瀉、紅斑)都大大改善。同時(shí)可以讓放化療平穩(wěn)地進(jìn)行到底。(2)酶療法可改善由放療或化療所引起的不良后果。例如纖維化潰瘍，淋巴腫大，白血球降低等癥狀。(3) 酶療法可減少手術(shù)后大量出血的機(jī)會(huì)，并可減少對(duì)止痛藥的需要，減輕腫瘤病人的痛苦。
具體實(shí)施例方式通過下面給出的本發(fā)明的具體實(shí)施例，可以進(jìn)一步清楚地了解本發(fā)明的內(nèi)容，但它們不是對(duì)本發(fā)明的限定。
實(shí)施例I :糜蛋白酶制劑對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用將腫瘤細(xì)胞與正常組織一起培養(yǎng)，對(duì)照組用生理鹽水，實(shí)驗(yàn)組用糜蛋白酶溶液。在對(duì)照組可以看到腫瘤細(xì)胞對(duì)正常組織不利影響，首先腫瘤細(xì)胞在自己繁殖中深入到正常組織中，并逐漸將其排擠，數(shù)天后正常細(xì)胞即出現(xiàn)壞死，細(xì)胞溶解，腫瘤細(xì)胞迅速繁殖；在含酶制劑的一組中則出現(xiàn)不同情況，開始腫瘤細(xì)胞向各方面繁殖，向正常組織一方生長(zhǎng)尤其快， 然后生長(zhǎng)突然停止，部分形成軸狀或球狀，有的則蜷縮，細(xì)胞核消失，最后溶化；而所加的酶制劑對(duì)正常組織毫無影響。實(shí)施例2 :糜蛋白酶制劑對(duì)小鼠S180肉瘤的療效(I)動(dòng)物選擇KM近交系小鼠，22g±2g，單一性別，每組8只。(2)動(dòng)物分組實(shí)驗(yàn)設(shè)空白對(duì)照組、糜蛋白酶制劑高劑量組、糜蛋白酶制劑低劑量組、環(huán)磷酰胺組(3)實(shí)驗(yàn)方法小鼠肉瘤(S180)離體細(xì)胞系液氮復(fù)蘇后，經(jīng)多次傳代培養(yǎng)，消化離心，以IO7/ ml的細(xì)胞濃度(O. 2ml)接種于健康KM小鼠皮下，15天后形成一厘米大小實(shí)體腫瘤，斷頸處死裸鼠，70%酒精浸泡I分鐘，無菌條件下剝離腫瘤，剪切成Imm3大小的組織塊，選擇新鮮無壞死的腫瘤組織，以生理鹽水洗五遍，組織勻漿器輕輕研磨至細(xì)胞懸液，150目細(xì)胞篩過濾，活瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)，配制瘤細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度為I X 107/ml，每鼠右側(cè)腋窩皮下接種
O.Iml (I X106/ml)。接瘤24h后給藥。終止治療后次日，各組動(dòng)物斷頸處死，剝離腫瘤體稱
重。按公式計(jì)算腫瘤抑制率％。
權(quán)利要求
1.一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途，其特征是開拓了蛋白水解酶制劑治療腫瘤的新用途。
2.一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途，根據(jù)權(quán)利要求I所述，其特征是蛋白水解酶制劑為糜蛋白酶制劑。
3.一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途，根據(jù)權(quán)利要求2所述，其特征是糜蛋白酶制劑的主要成分為糜蛋白酶，系自牛或豬胰中提取的一種蛋白水解酶。
4.一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途，根據(jù)權(quán)利要求2所述，其特征是糜蛋白酶制劑的主要輔料有右旋糖酐、甘露醇和注射用水。
5.一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途，根據(jù)權(quán)利要求I所述，其特征是在放化療前后使用蛋白水解酶制劑，可改善由放療或化療所引起的不良后果。
全文摘要
發(fā)明公開了一種蛋白水解酶制劑在治療腫瘤中的用途。用小鼠S180肉瘤細(xì)胞接種于健康KM小鼠皮下，次日注射給藥，高劑量組抑瘤率達(dá)到70％以上，開拓了蛋白水解酶制劑治療腫瘤的新用途。
文檔編號(hào)A61K38/48GK102600460SQ201210116679
公開日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2012年4月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月20日
發(fā)明者王國(guó)新, 趙鋼 申請(qǐng)人:天津濟(jì)命生生物科技有限公司