專利名稱：Glp-1類似物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及糖尿病相關(guān)的藥物領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種具有延長的胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)類的體內(nèi)半衰期的GLP-1類似物。本發(fā)明還涉及該GLP-1類似物的制備方法以及在制備糖尿病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及的GLP-1氨基酸(glucagon-likepeptide-Ι,以下簡(jiǎn)稱GLP_1)是主要由小腸L細(xì)胞分泌的一種37個(gè)組成的多肽，其活性形式為GLP-1 (7-37) OH和GLP-1 (7-36)NH2 (Mojsov S，J Clin Invest. 1987 Feb; 79(2) : 616-9)。GLP-1 明顯減低人用餐后的血糖，能刺激胰島素的產(chǎn)生，同時(shí)還能起到一定減肥效應(yīng)，并且不會(huì)引起低血糖癥(DruckerD J, Diabetes. 1998 Feb; 47(2) : 159-69)。近期研究還表明GLP-1有胰腺再生作用(Drucker D J, 2003Dec; 144 (12) : 5145-8)。此外，因?yàn)镚LP-1為完全人源化多肽，作為臨床藥物在安全上具有較大優(yōu)勢(shì)。然而，GLP-1 (7-37)的血清半衰期僅僅為3-5分鐘，每天多次注射給藥在臨床使用中非常不方便。目前已經(jīng)有不少研究 采用GLP-1類似物融合蛋白技術(shù)解決GLP-1類似物在體內(nèi)的存留時(shí)間(CN90101167. 3、CN200710018734. 2、CN200410054397. 9、CN01820232. 2、CN200380110152. 7、CN200510039265. 3、CN200610127237.1、CN200910009642. 7)，然而，
現(xiàn)有的技術(shù)與臨床理想的目標(biāo)還有很大距離，普遍都還沒有達(dá)到臨床標(biāo)準(zhǔn)，最近NovoNorisk生產(chǎn)的利拉魯肽為GLP-1類似物，其對(duì)GLP-1進(jìn)行了棕櫚酸的修飾，并于2009年于美國上市。但是利拉魯肽也存在半衰期短的問題，其劑型仍需每日注射。因此，目前存在對(duì)解決GLP-1體內(nèi)半衰期短的方法的需求。

發(fā)明內(nèi)容
除非另外指出，本文所述的“Fmoc策略”是指以聚合物樹脂作為固相反應(yīng)基質(zhì)，將氨基端Fmoc保護(hù)的氨基酸在偶聯(lián)試劑的存在下依次縮合，從而合成多肽的合成方法。其具體方法參見 Fmoc solid phase peptide synthesis: a practical approach, 2000,Oxford University Press.
本發(fā)明的一個(gè)目的是針對(duì)臨床上GLP-1類似物在體內(nèi)存留時(shí)間較短，需要每天注射給藥的缺限，提供一種半衰期較長的GLP-1的類似物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種GLP-1類似物在制備治療糖尿病的藥物中的應(yīng)用，以及該GLP-1類似物在制備治療和/或預(yù)防肥胖癥的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供一種以GLP-1類似物作為有效成分的藥用組合物，其包含上述GLP-1類似物。其中，所述的藥物組合物還包含一種或多種藥學(xué)上可接受的輔料，并且所述藥物組合物優(yōu)選為注射劑，進(jìn)一步優(yōu)選為凍干粉針或溶液注射劑。用于實(shí)現(xiàn)上述目的的技術(shù)方案如下
一方面，本發(fā)明提供一種GLP-1類似物，所述GLP-1類似物具有下列通式A 7HAEX10T FTSDVS X18YLEX22QA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 n2X2通式A，
其中，X10為甘氨酸或半胱氨酸，X18為絲氨酸或半胱氨酸，X22為甘氨酸或者半胱氨酸，X25為丙氨酸或半胱氨酸，X30為丙氨酸或半胱氨酸，X33為纈氨酸或半胱氨酸，并且Χ1(ι、Χ 8>X25> X30和X33中有且只有兩個(gè)為半胱氨酸W1X1表示有II1個(gè)X1, H1=O^O,且X1為精氨酸、丙氨酸、酪氨酸賴氨酸、異亮氨酸或甲硫氨酸；η2χ2表示有η2個(gè)Χ2，η2=(Γ30，且X2為精氨酸、丙氨酸、酪氨酸賴氨酸、異亮氨酸或甲硫氨酸；nl、n2不同時(shí)為0，以及通式A中含有的兩個(gè)半胱氨酸均形成二硫鍵。優(yōu)選地，所述GLP-1類似物具有下列通式1:
7HAEX10T FTSDVS X18YLEGQA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 η2Χ2通式I，其中Ii1=I 30, η2=1 30。所述具有通式I的GLP-1類似物如
權(quán)利要求
1.一種GLP-1類似物，所述GLP-1類似物具有下列通式A 7HAEX10T FTSDVS X18YLEX22QA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 n2X2通式A，其中，X10為甘氨酸或半胱氨酸，X15為天冬氨酸或半胱氨酸，X22為甘氨酸或半胱氨酸，X30為丙氨酸或半胱氨酸，X33為纈氨酸或半胱氨酸，并且Χ1(Ι、Χ15、Χ22、Χ3(Ι和X33中至少有一個(gè)為半胱氨酸；Ii1X1表示有Ii1個(gè)X1, ηι=Γ30,且X1為甘氨酸、丙氨酸或纈氨酸；η2Χ2表示有η2個(gè)Χ2，η2=(Γ30，且X2為甘氨酸、丙氨酸或纈氨酸；以及通式A中含有的兩個(gè)半胱氨酸均形成二硫鍵。
2.如權(quán)利要求1所述的GLP-1類似物，其特征在于，所述GLP-1類似物具有下列通式7HAEX10T FTSX15V SSYLE X22QAAK EFIX30W LX33KGR G37H1X1C η2Χ2通式I,其中ηι=3 30，η2=3 30 ;優(yōu)選地，所述GLP-1類似物為SEQ ID NO 82: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37 GGGGG GGGGG C GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 83: 7HAEGT FTSDV SSYLE CQMK EFIAff LVKGR G37 GGGGG C GGGGG GGGGG ；或SEQ ID NO 84: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37 GGG C GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG。
3.如權(quán)利要求1所述的GLP-1類似物，其特征在于，所述GLP-1類似物具有下列通式II7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G3S1X1C η2Χ2通式II，Ii1=I 20，η2=0 25，并且其中X1為甘氨酸、丙氨酸或纈氨酸，X2為甘氨酸、丙氨酸或繳氨酸；優(yōu)選地，1^=3 20, η2=3 25 ;進(jìn)一步優(yōu)選地,所述1^=5 15, η2=3 9。
4.如權(quán)利要求3所述的GLP-1類似物，其特征在于，所述GLP-1類似物為SEQIDNO1:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGC GGG ；SEQIDNO2:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGGGGGGC GGG ；SEQIDNO3:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRGyGGGGGGGGGGGGGGGC GGG ；SEQIDNO4:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGC GGGGG G ；SEQIDNO5:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGC GGGGG GGGG ；SEQIDNO6:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGGGGGGC GGGGG G ；SEQIDNO7:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGRG37GGGGG GGGGGC GGGGGGGGG ；SEQID NO 8: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGGGGGGC GGGGGSEQ ID NO 9: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGGGGGGC GGGGGGGGG ；SEQIDNO10:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA C AAA ；SEQIDNO11:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAC AAA ；SEQIDNO12:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAAAAAAC AM ；SEQIDNO13:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA C AAAAA A ；SEQIDNO14:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA C AAAAA AAAA ；SEQIDNO15:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAC AAAAA A ；SEQIDNO16:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAC AAAAAAAAA ；SEQIDNO177HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAAAAAACAAAAA ASEQIDNO187HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAAAAAACAAAAA AAAA SEQIDNO19:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV C VVV ；SEQIDNO20:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVV ；SEQIDNO21:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVC VVV ；SEQIDNO22:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV C VVVVV V ；SEQIDNO23:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV C VVVVV VVVV ；SEQIDNO24:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVVVV V ；SEQIDNO25:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVVVVVVVV ；SEQIDNO267HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVCVVVVV V-或SEQIDNO277HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVCVVVVV VVVVo
5.如權(quán)利要求1所述的GLP-1類似物，其特征在于，所述GLP-1類似物具有下列通式III7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37 Ii1X1 C n2X2通式III,其中，Ii1=I 10，n2=0 25，X1為甘氨酸、丙氨酸或纈氨酸，X2為甘氨酸、丙氨酸或纈氨酸；優(yōu)選地，1^=3 10, n2=3 25 ；或者，Ii1=I 5, n2=10 20 ;進(jìn)一步優(yōu)選地，1^=3 5, n2=10 20。
6.如權(quán)利要求5所述的GLP-1類似物，其特征在于，所述GLP-1類似物為SEQ ID NO 28: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37G C GGGGG GGGGG ；SEQ ID NO 29: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQMK EFICff LVKGR G37G C GGGGG GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 30: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37G C GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 31: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GG C GGGGG GGGGG ；SEQ ID NO 32: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQMK EFICff LVKGR G37GG C GGGGG GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 33: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GG C GGGGG
7.如權(quán)利要求1所述的GLP-1類似物，其特征在于，所述GLP-1類似物具有下列通式IV7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LCKGR G37 Ii1X1 C n2X2通式IV其中，Ii1=I 10，n2=0 30，X1為甘氨酸、丙氨酸或纈氨酸，X2為甘氨酸、丙氨酸或纈氨酸；優(yōu)選地，1^=3 10, n2=3 30 ;或者，Ii1=I 5, n2=10 20 ;進(jìn)一步優(yōu)選地1^=3 5,n9=10 20。
8.如權(quán)利要求7所述的GLP-1類似物，其特征在于，所述GLP-1類似物為
9.如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的GLP-1類似物的制備方法，所述制備方法包括Fmoc策略的固相多肽合成；制成的藥物組合物包含如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的GLP-1類似物和一種或多種藥學(xué)上可接受的輔料。
10.如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的GLP-1類似物在制備治療糖尿病、肥胖癥和/或糖尿病、肥胖癥相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用；特別是在制備預(yù)防肥胖癥的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了GLP-1類似物及其制備方法與應(yīng)用。所述GLP-1類似物具有下列通式A7HAEX10TFTSDVSX18YLEX22QAX25KEFIX30WLX33KGRG37n1X1n2X2。本發(fā)明的GLP-1類似物能夠有效增加GLP-1的血液半衰期，克服其因?yàn)榘胨テ诙潭鵁o法在臨床上使用的現(xiàn)狀，在糖尿病、肥胖癥治療藥物領(lǐng)域較有應(yīng)用前景。本發(fā)明還公開了所述GLP-1類似物的制備方法及其應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P3/04GK103059127SQ201310004538
公開日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2013年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月7日
發(fā)明者李瑛 申請(qǐng)人:天津嘉宏科技有限公司